Микроскопическое исследование материала

Бактериологическое исследование

Лабораторная диагностика неориккетсиоза собак

Серологическая диагностика

Биопроба. Инфекция, вызываемая E.phagocytophila воспроизводится введением дефибринированной крови, взятой в период лихорадки, крупному рогатому скоту, овцам. Инкубационный период составляет 4-8 дней. Эрлихиоз собак воспроизводится заражением животных кровью, возможно культи­вирование возбудителя в культуре моноцитов собак. При заражении кро­вью молодых лошадей клинические признаки инфекции E.equi воспроизво­дятся не всегда.

Выделение и идентификация культуры возбудителя

Для изоляции возбудителей используют перевиваемые или первичные куль­туры клеток костного мозга и нейтрофилов крови. Идентификацию возбу­дителя проводят микроскопически, в РИФ, ПЦР.

Испытаны непрямой метод флуоресцирующих антител, ЭЛИЗА-тест для обнаружения антител в крови при инфекциях, вызываемых Е.canis, E.equi и другими эрлихиями. Выпускается диагностический набор для ЭЛИЗА (фир­ма Helica Biosystems).

Возбудитель относится к трибе Rickettsiae, роду Neorickettsia, представ­ленному одним видом Nihelminthoeca. В настоящее время род Neorickettsia дополнен видами N. risticii и N. sennetsu. В природе этот вид риккетсий обитает в организме трематоды Nanophyetus salmonicida, а он, в свою очередь, в организме лососевых рыб. Все стадии развития трематоды (яйца, редии, церкарии, метацеркарии) инфекционны для со­бак. Возбудитель в искусственных питательных средах, куриных эмбри­онах не культивируется. Паразитирует в ретикулоэндотелиальных клет­ках лимфоидной системы, включая макрофаги. Собаки, лисы заражаются при поедании рыбы, развивается лихорадка. Болезнь регистрируется в северных районах США. Лабораторная диагностика основывается на результатах микро­скопического исследования материала, выявлении антител методом не­прямой иммуннофлуоресценции.

Объектом исследования являются прижизненно взятые биоптаты из лим­фатических узлов на стадии лихорадки. Кровь содержит возбудитель, но методом микроскопии его обнаружить трудно. Риккетсий лабильны, но при -70° С выживают до 6 месяцев.

Мазки фиксируют метанолом, окрашивают по Ромаиовскому-Гимза, Маккиавелло. Возбудитель в окрашенных препаратах имеет кокковидную фор­му или полиморфен (короткие палочки, кольцевидные структуры, иногда сложные колонии), локализуется в цитоплазме ретикулярных клеток лимфоидных тканей; по Ромаиовскому-Гимза окрашивается в голубой, Маккиавелло — голубой и розовый цвета. В циркулирующих лимфоцитах воз­будитель не выявляется, хотя кровь инфекционна.